Zapytanie ofertowe nr 01/BCX-InnoBioVet/2026 - na wykonanie usługi badawczej obejmującej przeprowadzenie procesu immortalizacji mezenchymalnych komórek stromalnych (MSC) pochodzących od psa, a następnie ich dalszej modyfikacji genetycznej oraz kompleksowa ocena jakości i bezpieczeństwa uzyskanych linii komórkowych.
Notice description
Powstaje w kontekście projektu:
FENG.01.01-IP.01-A1B2/25 - Innowacyjny bezkomórkowy lek biologiczny dla zastosowań w weterynarii (InnoBioVet)
Przedmiotem zamówienia jest usługa badawcza obejmująca przeprowadzenie procesu immortalizacji mezenchymalnych komórek stromalnych (MSC) pochodzących od psa, a następnie ich dalszej modyfikacji genetycznej oraz kompleksowa ocena jakości i bezpieczeństwa uzyskanych linii komórkowych.
Przedmiot zamówienia obejmuje kompleksową realizację wszystkich opisanych poniżej działań i osiągnięcie wszystkich zdefiniowanych celów:
Etap 1: Wybór optymalnego zestawu do immortalizacji MSC psich
Cel:
• Wytypowanie najbardziej efektywnego zestawu wektorów genetycznych do immortalizacji MSC psich, zapewniającego stabilną proliferację oraz zachowanie charakterystycznych cech MSC.
Zakres prac:
• Zaprojektowanie i przygotowanie wektorów genetycznych zawierających co najmniej 3 geny immortalizacyjne w różnych wariantach transdukcji:
• Warianty pojedyncze: A, B, C
• Warianty kombinacyjne: AB, AC, BC, ABC
• Transdukcja MSC psich i ocena efektywności transdukcji.
• Charakterystyka fenotypowa transdukowanych komórek przy użyciu cytometrii przepływowej (FCM) w celu oceny ekspresji markerów MSC.
• Ocena potencjału proliferacyjnego ( w tym określenie PDT) komórek po transdukcji.
• Wybór najbardziej optymalnego wariantu wektora genetycznego na podstawie wyników badań.
Etap 2: Przeprowadzenie immortalizacji MSC wraz z dodatkową modyfikacją genetyczną oraz przygotowanie banków MCB
Cel:
• Utworzenie stabilnej linii immortalizowanych MSC psich wybranym wariantem kombinacji genów oraz przeprowadzenie drugiej modyfikacji genetycznej poprzez wprowadzenie terapeutycznego enhancera. Następnie przygotowanie banków komórkowych (MCB) do dalszych zastosowań.
Zakres prac:
• Transdukcja MSC psich wybraną kombinacją wektorów genetycznych
• Dodatkowa modyfikacja genetyczna poprzez wprowadzenie terapeutycznego enhancera (przy użyciu kolejnej transdukcji lub innej metody edycji genetycznej).
• Opracowanie i optymalizacja protokołu hodowli immortalizowanych MSC zapewniającego stabilność właściwości hodowanych komórek.
• Ocena stabilności fenotypu oraz zachowania zdolności do różnicowania w chondrocyty adipocyty, osteocyty.
• Przygotowanie głównego banku komórkowego (MCB) obejmującego minimum 10 fiolek zawierających po minimum 3x10^6 komórek każda.
• Wstępna kontrola jakości obejmująca:
- Ocena morfologii (morfologia nie odróżniająca się od materiału wyjściowego tj. pierwotnej linii komórkowej)
- Ocena potencjału proliferacyjnego ( w tym określenie PDT) komórek po transdukcji
- Wstępna ocena aktywności terapeutycznego enhancera.
Etap 3: Ocena jakości (QC) – charakterystyka i bezpieczeństwo linii komórkowych
Cel:
• Kompleksowa analiza biologiczna i bezpieczeństwa uzyskanych immortalizowanych MSC psich, obejmująca charakterystykę fenotypową, ocenę stabilności genetycznej oraz funkcjonalną ocenę potencjału terapeutycznego.
Zakres prac:
1. Charakterystyka uzyskanych linii komórek w odniesieniu do populacji wyjściowej:
• Ocena fenotypu komórek (FCM) – analiza ekspresji markerów MSC.
• Badanie zdolności różnicowania (adipogeneza, osteogeneza, chondrogeneza).
2. Ocena bezpieczeństwa:
• Analiza miejsc integracji wektora w genomie komórek przy użyciu sekwencjonowania NGS.
• Badanie stabilności genetycznej poprzez analizę profilu STR.
• Ocena poziomu ekspresji onkogenów oraz genów supresorowych nowotworów za pomocą qPCR, lub/i Western blot lub RNA-seq..
• Wykazanie w ramach powyższych analiz, że transgen zintegrowany jest w bezpiecznych miejscach, stabilność genetyczna jest potwierdzona, a onkogeny pozostają na poziomie nie wyższym niż w komórkach pierwotnych.
3. Ocena potencjału terapeutycznego:
• Analiza sekretomu (profil cytokin i czynników wzrostu metodą ELISA) wynikiem której będzie wykazanie stabilnej ekspresji terapeutycznego enhancera
4. Testy stabilności:
• Długoterminowa (do p10) analiza zmian fenotypowych i stabilności genetycznej poprzez analizę profilu STR.
• Ocena trwałości ekspresji terapeutycznego enhancera
Wynikiem przeprowadzonych prac będą: Dwie unieśmiertelnione stabilne genetycznie linie psich MSC, jedna z dodatkową stabilną ekspresją enhancera terapeutycznego. Wykazujące zdolność do różnicowania w chondrocyty, adipocyty, osteocyty, oraz charakteryzujące się fenotypem odpowiadającym pierwotnym psim komórkom MSC oraz raport (w formie ustalonej między Zamawiającym a Wykonawcą na etapie realizacji prac) potwierdzający uzyskane wyniki.
Okres gwarancji: nie dotyczy
Miejsce realizacji
Cała polska
FENG.01.01-IP.01-A1B2/25 - Innowacyjny bezkomórkowy lek biologiczny dla zastosowań w weterynarii (InnoBioVet)
Przedmiotem zamówienia jest usługa badawcza obejmująca przeprowadzenie procesu immortalizacji mezenchymalnych komórek stromalnych (MSC) pochodzących od psa, a następnie ich dalszej modyfikacji genetycznej oraz kompleksowa ocena jakości i bezpieczeństwa uzyskanych linii komórkowych.
Przedmiot zamówienia obejmuje kompleksową realizację wszystkich opisanych poniżej działań i osiągnięcie wszystkich zdefiniowanych celów:
Etap 1: Wybór optymalnego zestawu do immortalizacji MSC psich
Cel:
• Wytypowanie najbardziej efektywnego zestawu wektorów genetycznych do immortalizacji MSC psich, zapewniającego stabilną proliferację oraz zachowanie charakterystycznych cech MSC.
Zakres prac:
• Zaprojektowanie i przygotowanie wektorów genetycznych zawierających co najmniej 3 geny immortalizacyjne w różnych wariantach transdukcji:
• Warianty pojedyncze: A, B, C
• Warianty kombinacyjne: AB, AC, BC, ABC
• Transdukcja MSC psich i ocena efektywności transdukcji.
• Charakterystyka fenotypowa transdukowanych komórek przy użyciu cytometrii przepływowej (FCM) w celu oceny ekspresji markerów MSC.
• Ocena potencjału proliferacyjnego ( w tym określenie PDT) komórek po transdukcji.
• Wybór najbardziej optymalnego wariantu wektora genetycznego na podstawie wyników badań.
Etap 2: Przeprowadzenie immortalizacji MSC wraz z dodatkową modyfikacją genetyczną oraz przygotowanie banków MCB
Cel:
• Utworzenie stabilnej linii immortalizowanych MSC psich wybranym wariantem kombinacji genów oraz przeprowadzenie drugiej modyfikacji genetycznej poprzez wprowadzenie terapeutycznego enhancera. Następnie przygotowanie banków komórkowych (MCB) do dalszych zastosowań.
Zakres prac:
• Transdukcja MSC psich wybraną kombinacją wektorów genetycznych
• Dodatkowa modyfikacja genetyczna poprzez wprowadzenie terapeutycznego enhancera (przy użyciu kolejnej transdukcji lub innej metody edycji genetycznej).
• Opracowanie i optymalizacja protokołu hodowli immortalizowanych MSC zapewniającego stabilność właściwości hodowanych komórek.
• Ocena stabilności fenotypu oraz zachowania zdolności do różnicowania w chondrocyty adipocyty, osteocyty.
• Przygotowanie głównego banku komórkowego (MCB) obejmującego minimum 10 fiolek zawierających po minimum 3x10^6 komórek każda.
• Wstępna kontrola jakości obejmująca:
- Ocena morfologii (morfologia nie odróżniająca się od materiału wyjściowego tj. pierwotnej linii komórkowej)
- Ocena potencjału proliferacyjnego ( w tym określenie PDT) komórek po transdukcji
- Wstępna ocena aktywności terapeutycznego enhancera.
Etap 3: Ocena jakości (QC) – charakterystyka i bezpieczeństwo linii komórkowych
Cel:
• Kompleksowa analiza biologiczna i bezpieczeństwa uzyskanych immortalizowanych MSC psich, obejmująca charakterystykę fenotypową, ocenę stabilności genetycznej oraz funkcjonalną ocenę potencjału terapeutycznego.
Zakres prac:
1. Charakterystyka uzyskanych linii komórek w odniesieniu do populacji wyjściowej:
• Ocena fenotypu komórek (FCM) – analiza ekspresji markerów MSC.
• Badanie zdolności różnicowania (adipogeneza, osteogeneza, chondrogeneza).
2. Ocena bezpieczeństwa:
• Analiza miejsc integracji wektora w genomie komórek przy użyciu sekwencjonowania NGS.
• Badanie stabilności genetycznej poprzez analizę profilu STR.
• Ocena poziomu ekspresji onkogenów oraz genów supresorowych nowotworów za pomocą qPCR, lub/i Western blot lub RNA-seq..
• Wykazanie w ramach powyższych analiz, że transgen zintegrowany jest w bezpiecznych miejscach, stabilność genetyczna jest potwierdzona, a onkogeny pozostają na poziomie nie wyższym niż w komórkach pierwotnych.
3. Ocena potencjału terapeutycznego:
• Analiza sekretomu (profil cytokin i czynników wzrostu metodą ELISA) wynikiem której będzie wykazanie stabilnej ekspresji terapeutycznego enhancera
4. Testy stabilności:
• Długoterminowa (do p10) analiza zmian fenotypowych i stabilności genetycznej poprzez analizę profilu STR.
• Ocena trwałości ekspresji terapeutycznego enhancera
Wynikiem przeprowadzonych prac będą: Dwie unieśmiertelnione stabilne genetycznie linie psich MSC, jedna z dodatkową stabilną ekspresją enhancera terapeutycznego. Wykazujące zdolność do różnicowania w chondrocyty, adipocyty, osteocyty, oraz charakteryzujące się fenotypem odpowiadającym pierwotnym psim komórkom MSC oraz raport (w formie ustalonej między Zamawiającym a Wykonawcą na etapie realizacji prac) potwierdzający uzyskane wyniki.
Okres gwarancji: nie dotyczy
Miejsce realizacji
Cała polska
Time limit for receipt of tenders
2026-08-20 21:59:59.0
Location
Kraj: Polska
Category assortment
Consultancy
Buyer details
Bioceltix S.A.
Bierutowska 57-59, bud. III
51-317 Wrocław
Województwo: dolnośląskie
Kraj: Polska
NIP: 8992794360
Bierutowska 57-59, bud. III
51-317 Wrocław
Województwo: dolnośląskie
Kraj: Polska
NIP: 8992794360
