Optymalizacji indukcji ekspresji i nadprodukcji białka rekombinowanego (na szczepie lub z biomasy dostarczonych przez Zamawiającego) oraz opracowanie procesu jego izolacji i oczyszczania w wariancie A lub B:

Notice description

WARIANT A: Przedmiotem zamówienia jest usługa badawcza polegająca na:
Optymalizacji indukcji ekspresji i nadprodukcji białka (na szczepie dostarczonym przez Zamawiającego) oraz proces izolacji i oczyszczania białka rekombinowanego
Wymogi dodatkowe
• Oczyszczone białko musi zachować aktywność biologiczną
• Zamawiający będzie prowadził testy aktywności w swoich laboratoriach
• Wykonawca zobowiązany jest do współpracy w zakresie optymalizacji parametrów procesu
Wykonawca zobowiązuje się do przygotowania wyceny dla obydwu wariantów zlecenia
Zamawiający prowadzi badania in vitro nad kilkoma konstruktami białkowymi o zróżnicowanych właściwościach fizykochemicznych.
Podstawowe parametry konstruktów:
1. Masa cząsteczkowa (MW): 25–300 kDa
2. Stan oligomeryczny: monomery i oligomery
3. pI: 4–10
4. Konstrukty białkowe w fuzji ze znacznikiem (np. His-tag)
5. Białka rozpuszczalne w wodzie
6. Brak wymogu usuwania metki
7. Podstawowe parametry białek oraz skład buforu stabilizującego zostaną przekazane na dalszym etapie
8. Zawartość białka rekombinowanego: >0,5 mg/g mokrego osadu
9. Biomasa: Escherichia coli BL21 (lub inny system ekspresyjny)
Zakres oczekiwanej usługi w ramach zamówienia Wykonawca zobowiązany będzie do:
- W zależności od wybranego wariantu przez zamawiającego:
Wariant A:
1) Skalowania produkcji biomasy z dostarczonego (przez zleceniodawcę) szczepu produkcyjnego z wprowadzonym plazmidem produkcyjnym, optymalizacji warunków indukcji ekspresji i nadprodukcji białka w celu uzyskania wydajności produkcji na poziomie 1g białka/miesiąc
2) Dezintegracji biomasy komórkowej zawierającej nadprodukowane białko w sposób niedenaturujący
3) Oczyszczenia białka z zastosowaniem metod chromatograficznych (IEX, HIC lub równoważnych)
4) Uzyskania czystości min. 60% potwierdzonej densytometrycznie z SDS-PAGE
5) Wymiana buforu na dostarczony przez zamawiającego bufor stabilizujący
6) Filtracja produktu oczyszczania na filtrze 0,22 mikrometra w możliwie najkrótszym czasie po oczyszczaniu
7) Potwierdzenia wydajności produkcji białka wynoszącej minimum 1g/miesiąc
8) Otrzymania białka w stężeniu minimum 5 mg/ml
9) Białko dostarczone będzie w formie płynnej, w buforze stabilizującym, w porcjach po 50 ml
10) Potwierdzenia braku zawartości substancji zakazanych z listy ROZPORZĄDZENIE PARLAMENTU EUROPEJSKIEGO I RADY (WE) NR 1223/2009 z dnia 30 listopada 2009 r. dotyczące produktów kosmetycznych w produkcie oczyszczania
11) Potwierdzenia braku degradacji od C-końca (Western Blot, przeciwciała Anty-His-ta)
12) Potwierdzenia zdolności do przeskalowania procesu oczyszczania białek do skali 3g białka/miesiąc
13) Przygotowania szczegółowego raportu z procesu oczyszczania:
a) Protokół oczyszczania
b) Opis zastosowanej aparatury do produkcji, dezintegracji oraz oczyszczania wraz z zapisem parametrów fizykochemicznych procesu,
c) Opis analizy czystości wraz ze zdjęciami żeli po SDS-PAGE
d) Opis analizy Wesetrn blot wraz ze zdjęciami
e) Wykaz substancji chemicznych wykorzystanych w procesie produkcji dezintegracji i oczyszczania wraz z deklaracją braku zawartości substancji zakazanych z listy ROZPORZĄDZENIE PARLAMENTU EUROPEJSKIEGO I RADY (WE) NR 1223/2009 z dnia 30 listopada 2009 r. dotyczące produktów kosmetycznych
Szczegółowe dane techniczne będą przekazywane wybranemu Wykonawcy po podpisaniu umowy i NDA.

Miejsce realizacji
Cała polska
WARIANT B: Przedmiotem zamówienia jest usługa badawcza polegająca na:
izolacji i oczyszczaniu rekombinowanego białka z biomasy dostarczonej przez Zamawiającego
Wymogi dodatkowe
• Oczyszczone białko musi zachować aktywność biologiczną
• Zamawiający będzie prowadził testy aktywności w swoich laboratoriach
• Wykonawca zobowiązany jest do współpracy w zakresie optymalizacji parametrów procesu
Wykonawca zobowiązuje się do przygotowania wyceny dla obydwu wariantów zlecenia
Zamawiający prowadzi badania in vitro nad kilkoma konstruktami białkowymi o zróżnicowanych właściwościach fizykochemicznych.
Podstawowe parametry konstruktów:
1. Masa cząsteczkowa (MW): 25–300 kDa
2. Stan oligomeryczny: monomery i oligomery
3. pI: 4–10
4. Konstrukty białkowe w fuzji ze znacznikiem (np. His-tag)
5. Białka rozpuszczalne w wodzie
6. Brak wymogu usuwania metki
7. Podstawowe parametry białek oraz skład buforu stabilizującego zostaną przekazane na dalszym etapie
8. Zawartość białka rekombinowanego: >0,5 mg/g mokrego osadu
9. Biomasa: Escherichia coli BL21 (lub inny system ekspresyjny)
Zakres oczekiwanej usługi w ramach zamówienia Wykonawca zobowiązany będzie do:
- W zależności od wybranego wariantu przez zamawiającego:
Wariant B
1) Dezintegracji biomasy komórkowej zawierającej nadprodukowane białko w sposób niedenaturujący
2) Oczyszczenia białka z zastosowaniem metod chromatograficznych (IEX, HIC lub równoważnych)
3) Uzyskania czystości min. 60% potwierdzonej densytometrycznie z SDS-PAGE
4) Wymiana buforu na dostarczony przez zamawiającego bufor stabilizujący
5) Filtracja produktu oczyszczania na filtrze 0,22 mikrometra w możliwie najkrótszym czasie po oczyszczaniu
6) Potwierdzenia wydajności produkcji białka wynoszącej minimum 1g/miesiąc
7) Otrzymania białka w stężeniu minimum 5 mg/ml
8) Białko dostarczone będzie w formie płynnej, w buforze stabilizującym, w porcjach po 50 ml
9) Potwierdzenia braku zawartości substancji zakazanych z listy ROZPORZĄDZENIE PARLAMENTU EUROPEJSKIEGO I RADY (WE) NR 1223/2009 z dnia 30 listopada 2009 r. dotyczące produktów kosmetycznych w produkcie oczyszczania
10) Potwierdzenia braku degradacji od C-końca (Western Blot, przeciwciała Anty-His-ta)
11) Potwierdzenia zdolności do przeskalowania procesu oczyszczania białek do skali 3g białka/miesiąc
12) Przygotowania szczegółowego raportu z procesu oczyszczania:
a. Protokół oczyszczania
b. Opis zastosowanej aparatury do produkcji, dezintegracji oraz oczyszczania wraz z zapisem parametrów fizykochemicznych procesu,
c. Opis analizy czystości wraz ze zdjęciami żeli po SDS-PAGE
d. Opis analizy Wesetrn blot wraz ze zdjęciami
e. Wykaz substancji chemicznych wykorzystanych w procesie produkcji dezintegracji i oczyszczania wraz z deklaracją braku zawartości substancji zakazanych z listy ROZPORZĄDZENIE PARLAMENTU EUROPEJSKIEGO I RADY (WE) NR 1223/2009 z dnia 30 listopada 2009 r. dotyczące produktów kosmetycznych.
Wykonawca zobowiązuje się dostarczyć:
- 3 niezależne partie oczyszczonego białka w ilości: około 1-2 g w ciągu 2-4 miesięcy
- raport z oczyszczania białka
- dokładny, powtarzalny protokół oczyszczania
Szczegółowe dane techniczne będą przekazywane wybranemu Wykonawcy po podpisaniu umowy i NDA.
Miejsce realizacji
Cała polska

Make an offer

Time limit for receipt of tenders

2026-03-30 07:00:00.0

Location

Kraj: Polska

Category assortment

Measurements, tests and technical acceptance

Buyer details

Dentysta Sp z o.o.
Rędzińska 112
42-209 Częstochowa
Województwo: śląskie
Kraj: Polska
NIP: 9492224766

Contact details